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Post by alamin447 on Aug 2, 2023 1:04:15 GMT -5
误距离1(d1)测序读数,揭示了交联mRNA和前mRNA片段的有效恢复,这些读数携带所有主要器官(包括脑、肺、肾脏和睾丸)的特征性T到C转换(补充图1j,补充 表1 )。TIAL1 与其靶标的交联读数分布在多个器官中是相似的(图 1f)。该方法对于肝脏和脂肪组织中的另一种测试的 RBP (HuR) 也可 重现(补充图 1h,k)。综上所述,viP-CLIP 方案(补充 亚洲手机号码列表方法)是对传统 CLIP 方案的有用扩展,能够以高重现性从完整小鼠器官中识别交联 RNA 靶标,从而能够深入研究遗传小鼠中的 RBP-RNA 相互作用模型和不同的环境条件下(详细的分步协议可在协议交换()中找到。 小鼠肝脏中的肝脏 Tial1 viP-CLIP 揭示了参与脂来的目标是使用 viP-CLIP 识别肝脏中内源性和过表达 TIAL1 的 RNA 靶标。TIAL1 过表达是通过注射表达表位标记的 Tial1 (Ad-Tial1) 的重组腺病毒来实现的,导致 TIAL1 蛋白表达增加约 2.5 倍(补充图 2a )。对三只小鼠进行 viP-CLIP,每只小鼠使用识别内源性 TIAL1 蛋白的抗体或感染表达标记 TIAL1 蛋白 (Ad-Tial1) 的重组腺病毒的小鼠的抗 myc 抗体。我们获得了内源性 TIAL1 的1.3×10
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